Um Colitis ulcerosa festzustellen und die Ursache für die Symptome des Patienten von anderen Darmerkrankungen zu unterscheiden, führt der behandelnde Arzt eine Reihe von Untersuchungen durch. Dazu gehören eine Blutabnahme, um Entzündungswerte zu überprüfen, eine Darmspiegelung (Koloskopie), um Unterscheidungsmerkmale zu Morbus Crohn zu finden sowie Stuhlproben, um Infektionen auszuschließen und Entzündungsmarker sowie Blut im Stuhl auszuschließen. Darüber hinaus können bildgebende Verfahren, z. B. Ultraschall, Magnetresonanztomographie (MRT) und Computertomographie (CT), zum Einsatz kommen, um ein detailliertes Bild von benachbarten Organen und Gewebe zu erhalten.